通用胎牛血清是一種高度富含細胞生長因子、激素、蛋白質(zhì)和其他生物活性物質(zhì)的血清,是細胞培養(yǎng)中的重要成分。它通常通過穿刺采血未出生的胎牛獲得,再經(jīng)過自然層析、離心、三級0.1m微濾等嚴格處理工藝制成,以確保其無菌、無異物且質(zhì)量好。

1、質(zhì)量確認與準備
質(zhì)量驗證:在使用前,確認所購買的產(chǎn)品已經(jīng)過嚴格的質(zhì)量檢測,并附有相應(yīng)的質(zhì)量認證文件(如無菌檢測、內(nèi)毒素水平、病毒篩查等)。這有助于保證安全性和有效性。
預(yù)熱處理:由于該產(chǎn)品通常以冷凍形式儲存,在使用前需將其從-20°C或更低溫度的環(huán)境中取出,放置于4°C冰箱緩慢解凍,避免因快速升溫導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性。解凍后輕輕混勻,但避免劇烈搖晃以防氣泡產(chǎn)生。
2、滅活處理(可選)
滅活目的:某些情況下,為了去除血清中的補體成分或其他潛在的生物活性物質(zhì),需要對它進行滅活處理。然而,并非所有應(yīng)用都需要此步驟,具體是否需要滅活應(yīng)根據(jù)實驗需求決定。
滅活方法:將其置于56°C水浴鍋中加熱30分鐘,期間每隔一段時間輕柔搖動以確保均勻加熱。滅活完成后立即冷卻至室溫,然后分裝保存?zhèn)溆谩?/div>
3、分裝與儲存
分裝建議:為了避免反復(fù)凍融影響血清質(zhì)量,推薦將大包裝的產(chǎn)品分裝成小體積(如50ml或100ml),每次實驗僅取用所需量即可。分裝時要確保容器干凈無菌。
儲存條件:未使用的產(chǎn)品應(yīng)儲存在-20°C以下的環(huán)境中;已分裝且部分使用的血清則應(yīng)在4°C條件下短期保存(不超過一個月),長期保存仍需返回冷凍狀態(tài)。
4、配制培養(yǎng)基
添加比例:根據(jù)細胞類型及具體實驗要求確定它在培養(yǎng)基中的濃度,一般范圍為5%-20%。例如,大多數(shù)哺乳動物細胞系常用10%的胎牛血清。
混合均勻:將適量的產(chǎn)品加入到基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,充分攪拌直至溶解并混合均勻。注意不要引入過多氣泡。
5、過濾除菌(如果必要)
過濾目的:雖然高品質(zhì)的產(chǎn)品經(jīng)過了嚴格的無菌檢測,但在配制培養(yǎng)基時,特別是當(dāng)與其他成分混合后,可能需要通過0.22μm濾器進行額外的過濾除菌處理,以確保培養(yǎng)體系的無菌環(huán)境。
通用胎牛血清通過遵循上述步驟可以有效地支持細胞培養(yǎng)實驗,確保實驗結(jié)果的準確性和可靠性。同時,正確的儲存和使用方法也有助于延長其有效期,提高資源利用率。